Полярография в биохимических лабораторных исследованиях

28.01.2021 145 5.0 0

Полярографический метод является очень чувствительным и позволяет работать с небольшим объемами и разбавленными растворами. С помощью этого метода можно получать информацию об окислительно-восстановительных процессах. Он применяется при ферментативных исследованиях, а также для определения других биологически активных веществ. Однако полярография не нашла еще широкого распространения в клинико-диагностических и биохимических лабораторных исследованиях.

Основной частью полярографа — прибора для проведения полярографического анализа — является электролитическая ячейка. Она включает сосуд, содержащий анализируемый раствор, и два ртутных электрода. В качестве анода выступает ртуть на дне сосуда. Катодом служит непрерывно возобновляющаяся капля ртути, которая образуется на конце капиллярной трубки, заполненной ртутью.На рис. 33 показана простейшая электролитическая ячейка, которая широко применяется и в настоящее время. Научно-исследовательские и многие клинико-диагностические лаборатории оснащены различными видами полярографов отечественного и зарубежного производства. На рис. 34 показана одна из современных моделей полярографов.

Электролитическая ячейка

Рис. 33. Электролитическая ячейка:
1 — катод; 2 — ртутный анод; 3 — капилляр; 4 — электролизер; 5 — резиновая трубка; 6 — резервуар со ртутью; 7 — трубка со ртутью и платиновым контактом

Полярограф ПЭ-312

Рисунок 34. Полярограф ПЭ-312

Электролизер для полярографического анализа. В электролизёрах существующих конструкций проанализированный раствор и избыток ртути необходимо извлекать с помощью пипетки и фильтровальной бумаги. На это, как и на подготовку электролизера к последующему анализу, затрачивается много времени. С целью повышения производительности полярографии нами сконструирован электролизер, не имеющий вышеуказанных недостатков (рис. 35).

Электролизер для полярографического анализа

Электролизер изготовляется на обычном двухходовом стеклянном кране. Внутренний диаметр отводных трубок крана должен быть не менее 8 мм. В трубку над краном на высоте 10-15 мм впаивается платиновая проволока 1 диаметром около 1 мм с выступающими концами длиною 3-4 мм. С наружной стороны трубки у места выхода платиновой проволоки припаивается стеклянная трубка 2 для ртутно-платинового контакта 3. На расстоянии 10-15 мм от места впаивания платиновой проволоки трубку отрезают. Капсула 7 изготовляется из пробирки Видаля или плексигласа. Ее наружный диаметр должен быть приблизительно на 0,8-1 мм меньше внутреннего диаметра верхней трубки крана. Для этого пробирку с донного конца отрезают на высоте, равной расстоянию между поверхностью пробки крана и местом впаивания платиновой проволоки 1. В дне капсулы делают два перекрещивающихся желоба глубиной 1,5 мм. Когда капсула готова, ее осторожно опускают в верхнюю трубку крана. Платиновую проволоку 1 перед этим отгибают к стенке трубки. После опускания капсулы платиновую проволоку отгибают в капсулу и в нее наливают доверху очищенную ртуть.

Для фиксирования ртутно-капельного электрода в электролизере и регулирования емкости электролитической ячейки на верхнюю трубку крана надевается приспособление из плексигласа 5, представляющее собой поршень-цилиндр с внутренним воронкообразным отверстием 4. Диаметр этого отверстия может колебаться в пределах 2-6 мм в зависимости от внутреннего диаметра верхней трубки крана и количества исследуемого раствора. Наружный диаметр приспособления 5 на 0,5-0,7 мм меньше внутреннего диаметра трубки над краном. Высота приспособления 5 равняется расстоянию от поверхности ртути в капсуле 7 до конца верхней трубки над краном плюс 1-3 мм.

С наружной стороны приспособления у верхнего конца его делается круговой выступ шириной и высотой 2 мм. Приспособление 5 изготавливается нескольких размеров по длине к одной и той же электролитической ячейке. Это позволяет регулировать количество раствора, предназначенного для анализа, за счет образующегося пространства между нижним концом приспособления 5 и поверхностью ртути в капсуле 7. Когда электролизер собран, он подключается к полярографу. При перекрытом кране в электролитическую ячейку через отверстие 4 наливают исследуемый раствор. Им заполняют до половины приспособление 5. В отверстие приспособления 5 вставляется капилляр ртутно-капельного электрода, и при включении полярографа в сеть раствор анализируется. Затем с помощью пробки 8 крана проанализированный раствор, а также излишек ртути спускают через отросток 9 в подставленный сосуд. После этого электролизер снова готов к работе, поскольку остаток проанализированного раствора вытесняется вновь поступающим для анализа раствором.

Нами изготовлена батарея электролизеров, которые подключены параллельно к блоку полярографа. Это позволяет вносить в них серию исследуемых проб, что ведет к большей экономии времени.


Читайте также:

Комментарии
Имя *:
Email *:
Код *: